Оптимизированный рабочий процесс отображения поверхностей дрожжей для направленной эволюции протеаз

30 просмотров

11:16 мин.

4 августа 2026 г.

10.3791/72559-v

4 августа 2026 г.

30 просмотров

Medel B. Lim Suan Jr.¹ , Zuhair Quadri² , Soham R. Jorapur¹ , P. C. Dave P. Dingal¹^,²^,³

¹Department of Bioengineering, The University of Texas at Dallas, ²Department of Biological Sciences, The University of Texas at Dallas, ³Center for Systems Biology, The University of Texas at Dallas

Этот протокол обеспечивает оптимизированный рабочий процесс для направленной эволюции вирусных протеаз у Saccharomyces cerevisiae с использованием системы отбора на основе поверхностного дисплея. В нём описывается библиотека вставок ДНК и дизайн кассет субстрата, электропорация, оптимизированная для высокой эффективности трансформации, отбор клеток на основе сортировки клеток с флуоресценцией для расщепления протеаз, а также секвенирование обогащённых вариантов.