Name: Fare mesane Duvar Enjeksiyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-12T12:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 48 s
Description: Öğrenin fare mesane duvarına hücre enjeksiyonu için mikrocerrahi tekniği. Bu yöntem, mesane kök hücreleri ve kanser biyolojisi araştırmalarında hassas hücre yerleştirme imkanı sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Biz minnetle NIDDK Stanford Pediatrik Araştırma Fonu ve K08DK087895-01 Pilot hibe desteği kabul etmiş sayılırsınız.

1. Fare mesane Duvar Enjeksiyon Fare suşu, yaş ve cinsiyet seçimi, deneysel ihtiyaçlarına göre belirlenir. Bu immünolojik olgunluk, yaşlılık önce bir penceredir bu yana, 8 ile 12 hafta arasında yaş fareler kullanın. Genel bir kural olarak, farelerin stres kaynaklı karıştırıcı faktörlerin önlemek için deneysel manipülasyon en az bir hafta önce gelmelisiniz. <ol><li> Cerrahi masa yüzeyi sabun ve su ile temizleyin. </li><li> Cide Swipes'ı veya antiseptik mendil ile cerrahi masa yüzeyi silin. </li><li> Cerrahi kullanımdan önce temiz cerrahi aletler Otoklav. </li><li> Ayrıca, kullanımı hemen önce sıcak boncuk sterilizatör cerrahi aletlerin sterilize yanı sıra ameliyat sırasında hayvanlar arasında. </li><li> 100 mcL Hamilton şırınga ve 29 veya 30 gauge (1 / 2 inç uzun) İlk kullanımdan önce mutlak alkol ile tekrarlanan aspirasyon ve enjeksiyon ve son cerrahi işlemin sonunda iğne temizleyin. </li><li> Hamilton her hayvan arasındaki fosfat tamponlu salin solüsyonu steril şırıngalar yıkayın ve durulayın. </li><li> Izofluran% 2-5 arasında, izofluran indüksiyon odasında yerleştirerek farelerin anestezisi. </li><li> Genel anestezi sağlandıktan sonra normal vücut ısısını korumaya yardımcı olmak için altında, sıcak bir ped ile yatar pozisyonda odası ve yerden fare kaldırmak. </li><li> Memesi izofluran buharlaştırmak (uygun anestezi korumak için gerekli olarak% 1-3 oranında titre) içeren bir hayvanın burnu koyarak bakım anestezi elde edin. </li><li> Kesme makineleri ile karın cilt Tıraş. </li><li> Ameliyat sırasında dışkı bulaşmasını önlemek için anüs karşılamak için tek kullanımlık, steril cerrahi örtü kullanın. </li><li> (Alt karın) cerrahi alanında karşılamak için ikinci bir tek, steril cerrahi örtü kullanın. </li><li> Hazırlık üç adet Betadine batırılmış gazlı bez ile karın. Bu adımı üç kez tekrarlayın. </li><li> Büyütme diseksiyon mikroskobu kullanarak, daha düşük bir makas ile karın orta hat kesi olun. </li><li> Mesane Açığa. </li><li> Mesane dolu ise, kısmen kubbe hafifçe aşağı doğru basınç sıkıştırın. </li><li> Duvar içine iğne yukarı bakacak şekilde eğim ile mesane kubbesi (içi enjeksiyon), 29 veya 30 iğne ve şırınga kullanılarak, örnek solüsyonu (50 mcL kadar) enjekte edilir. </li><li> Mesane duvar içine örnek solüsyon enjekte etmek için şırınga pistonu itin. İyi lokalize bleb mesane duvar içine hücreleri başarılı enjeksiyon bir göstergesidir. </li><li> Şırınga çıkarın yara klipler ile kesi yakın ve fareyi bir ısıtıcı kurtarmak için izin. </li></ol> 2. Temsilcisi Sonuçlar: Kaçak sıvı değildir ve büyüklüğü sabit kalır iyi lokalize bleb mesane duvar (Şekil 1) içine hücrelerin başarılı bir enjeksiyon bir göstergesidir. Mesane duvarında enjekte edilen hücrelerin varlığını doğrulamak için histolojik analiz yapılabilir. <img src="/files/ftp_upload/2523/2523fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1 örnek olması için Hindistan mürekkep kullanarak başarılı mesane duvar enjeksiyon örneği. <img src="/files/ftp_upload/2523/2523fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 deneysel prosedürleri şematik.

<ol><li>Dinney, C. P., Fishbeck, R., Singh, R. K., Eve, B., Pathak, S., Brown, N., Xie, B., Fan, D., Bucana, C., Fidler, I. J., Killion, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+Characterization+of+Metastatic+Variants+from+Human+Transitional+Cell+Carcinoma+Passaged+by+Orthotopic+Implantation+in+Athymic+Nude+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Isolation and Characterization of Metastatic Variants from Human Transitional Cell Carcinoma Passaged by Orthotopic Implantation in Athymic Nude Mice.</a> The Journal of Urology. 154, 1532-1538 (1995).</li>
<li>Singh, A. V., Franke, A. A., Blackburn, G. L., Zhou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Soy+Phytochemicals+Prevent+Orthotopic+Growth+and+Metastasis+of+Bladder+Cancer+in+Mice+by+Alterations+of+Cancer+Cell+Proliferation+and+Apoptosis+and+Tumor+Angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Soy Phytochemicals Prevent Orthotopic Growth and Metastasis of Bladder Cancer in Mice by Alterations of Cancer Cell Proliferation and Apoptosis and Tumor Angiogenesis.</a> Cancer Res. 66, 1851-1858 (2006).</li>
<li>Yanagiuchi, A., Miyake, H., Nomi, M., Takenaka, A., Fujisawa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+the+Microenvironment+by+Growth+Factors+Regulates+the+In+Vivo+Growth+of+Skeletal+Myoblasts%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">Modulation of the Microenvironment by Growth Factors Regulates the In Vivo Growth of Skeletal Myoblasts.</a> BJU International. 103, 1569-1573 (2009).</li>
<li>Miyake, H., Hara, I., Yamanaka, K., Gohji, K., Arakawa, S., Kamidono, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overexpression+of+Bcl-2+Enhances+Metastatic+Potential+of+Human+Bladder+Cancer+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Overexpression of Bcl-2 Enhances Metastatic Potential of Human Bladder Cancer Cells.</a> British Journal of Cancer. 79, 1651-1656 (1999).</li>
<li>Chancellor, M. B., Yokoyama, T., Tirney, S., Mattes, C. E., Ozawa, H., Yoshimura, N., Groat, W. C. de, Huard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preliminary+Results+of+Myoblast+Injection+into+the+Urethra+and+Bladder+Wall%3A+a+Possible+method+for+the+Treatment+of+Stress+Urinary+Incontinence+and+Impaired+Detrusor+Contractility%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Preliminary Results of Myoblast Injection into the Urethra and Bladder Wall: a Possible method for the Treatment of Stress Urinary Incontinence and Impaired Detrusor Contractility.</a> Neurourol Urodyn. 19, 279-287 (2000).</li>
<li>Dinney, C. P., Tanguay, S., Bucana, C. D., Eve, B. Y., Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravesical+Liposomal+Muramyl+Tripeptide+Phosphatidylethanolamine+Treatment+of+Human+Bladder+Carcinoma+Growing+in+Nude+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Interferon+Cytokine+Res%22%5BJournal%5D)">Intravesical Liposomal Muramyl Tripeptide Phosphatidylethanolamine Treatment of Human Bladder Carcinoma Growing in Nude Mice.</a> J Interferon Cytokine Res. 15, 585-592 (1995).</li>
<li>Mohamedali, K. A., Kedary, D., Sweeney, P., Kamaty, A., Davisy, D. W., Evey, B. Y., Huangy, S., Thorpez, P. E., Dinney, C. P., Rosenblum, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Vascular-targeting+Fusion+toxin+VEGF121%2FrGel+Inhibits+the+Growth+of+Orthotopic+Human+Bladder+Carcinoma+Tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Neoplasia%22%5BJournal%5D)">The Vascular-targeting Fusion toxin VEGF121/rGel Inhibits the Growth of Orthotopic Human Bladder Carcinoma Tumors.</a> Neoplasia. 7, 912-920 (2005).</li>
<li>Slaton, J. W., Perrotte, P., Inoue, K., Dinney, C. P., Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interferon-%CE%B1-mediated+Down-Regulation+of+Angiogenesis-related+Genes+and+Therapy+of+Bladder+Cancer+Are+Dependent+on+Optimization+of+Biological+Dose+and+Schedule%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Interferon-α-mediated Down-Regulation of Angiogenesis-related Genes and Therapy of Bladder Cancer Are Dependent on Optimization of Biological Dose and Schedule.</a> Clinical Cancer Research. 5, 2726-2734 (1999).</li>
<li>Yokoyama, T., Huard, J., Pruchnic, R., Yoshimura, N., Qu, Z., Cao, B., De Groat, W. C., Kumon, H., Chancellor, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle-Derived+Cell+Transplantation+and+Differentiation+into+Lower+Urinary+Tract+Smooth+Muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Muscle-Derived Cell Transplantation and Differentiation into Lower Urinary Tract Smooth Muscle.</a> Urology. 57, 826-831 (2001).</li>
<li>Chan, E., Patel, A., Heston, W., Larchian, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Orthotopic+Models+for+Bladder+Cancer+Research%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">Mouse Orthotopic Models for Bladder Cancer Research.</a> BJU International. 104, 1286-1291 (1988).</li>
<li>Russell, P. J., Jelbart, M., Wills, E., Singh, S., Wass, J., Witherspoon, J., Raghavan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+characterization+of+a+new+human+bladder+cancer+cell+line+showing+features+of+squamous+and+glandular+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Cancer%22%5BJournal%5D)">Establishment and characterization of a new human bladder cancer cell line showing features of squamous and glandular differentiation.</a> Int. J. Cancer. 41, 74-74 (1988).</li>
<li>Ahlering, T. E., Dubeau, L., Jones, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+in+vivo+model+to+study+invasion+and+metastasis+of+human+bladder+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">A new in vivo model to study invasion and metastasis of human bladder carcinoma.</a> Cancer Res. 41, 6660-6660 (1987).</li>
<li>Heaney, J. A., Omellas, E. P., Daly, J. J., Lin, J. C., Rout, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+growth+of+human+bladder+cancer+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Urol%22%5BJournal%5D)">In vivo growth of human bladder cancer cell lines.</a> Invest. Urol. 15, 380-380 (1978).</li>
<li>Hadaschik, B., Black, P., Sea, J., Metwalli, A., Fazli, L., Dinney, C., Gleave, M., So, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated+mouse+model+for+orthotopic+bladder+cancer+using+transurethral+tumor+inoculation+and+bioluminescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">A validated mouse model for orthotopic bladder cancer using transurethral tumor inoculation and bioluminescence imaging.</a> BJU International. 100, 1377-1384 (2007).</li>
</ol>

Fare mesane duvarında enjeksiyon mesane duvar tanımlanmış alanlara belirli hücrelerin implantasyonu için sağlar. Bu teknik, mesane kanseri, düz kas ve kök hücre biyolojisi fare modelleri için geniş bir uygulama alanı vardır. Büyüme ve farklılaşma fizyolojik ilgili anatomik bağlamında ele böylece tanımı gereği, fare mesane duvar enjeksiyon ortotopik bir konuma mesane kanseri ya da kök hücrelerin giriş kolaylaştırır. Aslında, Dinney ve ark. ilk çıplak farelerin 1 ortotopik insan mesane kanseri xenografts araştı...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktifin Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td></tr><tr><td> İsofluranın (Aerrane) </td><td> Baxter </td><td> NDC 10019-773-60 </td></tr><tr><td> 29 veya 30 insülin iğnesi </td><td> Hamilton </td><td> 7803-06 ve 7803-07 </td></tr><tr><td> 100 mikrolitrelik şırınga </td><td> Hamilton </td><td> 7656-01 </td></tr></tbody></table>

fare mesane duvar enjeksiyon

Mouse Bladder Wall Injection

Fare mesane duvarında enjeksiyonu, kök hücre, düz kas ve kanser biyolojisi dahil olmak üzere mesane olgu, orthotopically incelemek için yararlı bir tekniktir. Enjeksiyonlar başlamadan önce, cerrahi alanda, su ve sabunla ve antiseptik solüsyon ile temizlenmesi gerekir. Cerrahi teçhizat kullanımdan önce ve her hayvan arasında sterilize edilmelidir. Her bir fare inhale izofluran anestezi altında yerleştirilir (indüksiyon için% 2-5, bakım için% 1-3) ve mesane makas ile karın orta hat kesi yaparak maruz kalmaktadır. Mesane doluysa, iki parmak arasında sıkarak nazik tarafından kısmen sıkıştırılmış. Ilgi hücre süspansiyonu intramural 29 veya 30 iğne ve 1 cc ya da daha küçük bir şırınga kullanarak mesane kubbe duvarın içine enjekte edilir. Sonra yara yara klipleri ve ısıtıcı kurtarmak için izin fare kullanılarak kapatılır. Mesane duvar enjeksiyon, hassas bir mikrocerrahi tekniği uygulama ile hakim olabilir.

Fare mesane duvar enjeksiyon orthotopically mesane kök hücre ve kanser biyolojisi incelemek için yararlı bir yaklaşımdır. Bu hassas mikrocerrahi yöntemi dikkatli tekniği ve uygulamaları ile hakim olabilir.

Fare mesane Duvar Enjeksiyon

Fare mesane duvarı enjeksiyonu; kök hücre, düz kas ve kanser biyolojisi dahil olmak üzere mesane fenomenlerinin ortotopik olarak incelenmesi için faydalı bir tekniktir.

Bu prosedürün genel amacı, mesane duvarının belirlenmiş bölgelerine hücre yerleştirmektir. Bu işlem, öncelikle mesaneyi açığa çıkarmak için abdominal bir insizyon yapılarak gerçekleştirilir. Prosedürün bir sonraki adımı, iğnenin eğimli ucunun intramural olarak yerleştirilmesidir.Prosedürün son adımı, hedeflenen hücreleri mesane duvarına enjekte etmek için şırınganın pistonunu itmektir. Hücrelerin başarılı bir şekilde implantasyonu, sıvı sızdırmayan ve boyutu sabit kalan, iyi lokalize olmuş bir bleb ile belirlenir. Bu tekniğin, farelere hücrelerin transüretral inokülasyonu gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, hücrelerin mesane içinde nereye implante olacağını yönlendirmeye olanak tanımasıdır.Enjeksiyon aşamalarının öğrenilmesi zor olduğundan, li kasının görsel gösterimi kritik önem taşır. İğnenin mesaneye giriş pozisyonunu ve doğru açıyı bilmek, tekniğin başarısı için esastır. Buradaki farelerin yaşını, cinsiyetini ve türünü deneyin gereksinimlerine göre seçiniz.Deneylerin başlangıcında 8 ila 12 haftalık fareler kullanılır; cerrahi masanın yüzeyi sabun ve su ile temizlenir. Ardından, cerrahi masa yüzeyi tek kullanımlık temizleme bezleri veya antiseptik mendillerle silinir. Ce

Research

JoVE Journal

Medicine

Bu video transüretral fare idrar yolu enfeksiyonlarına neden ve enfeksiyonların sonucunda dereceye ölçmek için yöntemler gösterecektir.

Transüretral İndüksiyon Fare İdrar Yolu Enfeksiyonu

Sistometriler küçük hayvanların mesane fonksiyonu ölçmek için etkili bir...

Küçük Kemirgenler sistometri ve Kullanımı: Mesane Chemosensation Çalışması

Ultrason ve bioluminescent görüntüleme ile intravezikal teslim Sarna ve izleme tümör büyümesinin antitümör etkileri değerlendirmek için ortotopik mesane tümörü modeli oluşturmak.

Bir Ortotopik Mesane Tümörü Model ve intravezikal Sarna Tedavisinin Değerlendirilmesi

Kaynak: O'Brien, V. P. ve diğerleri, Tekrarlayan Escherichia coli Idrar Yolu Enfeksiyonu Gardnerella vaginalis mesane maruziyeti tarafından fare içinde tetikleniyor. J. Vis. Exp. (2020)Bu video, önceden enfekte edilmiş bir fare modelinin mesane epitelinde bakteri kolonizasyonu ve konak-patojen etkileşimlerini görselleştirmek için taramalı elektron mikroskopisi kullanımını göstermektedir.

Bakteriyel Enfeksiyonun Görselleştirilmesi İçin Fare Mesanesi Dokusu Hazırlanması

Bu videoda, organ ortamının gelişmekte olan tümörler üzerindeki rolünü incelemek için kültürlenmiş mesane tümörü organoidlerinin murin mesanesine ortotopik transplantasyonunu açıklıyoruz.

Mesane Tümörü Organoid Modeli: Mesane Organoidlerinin Alıcı Murin Mesanesine Ortotopik Transplantasyonu İçin Bir Yöntem

Bu videoda, kanser hücrelerini bir fare modelinin mesanesine iletmenin intravezikal prosedürünü açıklıyoruz. Bu prosedür, terapötik stratejiler geliştirmek için kullanılabilecek bir ortotopik mesane tümörü modeli oluşturmaya yardımcı olur.

Ortotopik Mesane Tümörünün Fare Modelinde Modellenmesi: Kanser Hücrelerinin Murin Mesanesine İntravezikal Uygulanması İçin Bir Prosedür

Birincil invaziv kadavradan mesane kanseri zenograftlarını aşılamak için kurulan teknik laparotomi ve mesane seferberlik gerektirir. Bu prosedür, fareler üzerinde önemli morbidite uğratan teknik açıdan zor ve zaman alıcıdır. Bu nedenle perkütan yaklaşım ultrason rehberlik kullanarak, yüksek hassasiyet geliştirdi.

Kemirgen Ortotopik Mesane ksenogratflarının Minimal İnvaziv kurulması

Amerika Birleşik Devletleri'nde yaklaşık 3-8000000 insan interstisyel sistit / mesane ağrı sendromu (IC / BPS), pelvik ağrı ile kısmen özelliği, bir zayıflatıcı durum muzdarip. Duruma sinir sistemi katkılarını araştırmak amacıyla, idrar kesesi ağrı fizyolojik modeli fareler ve sıçanlar kullanılır.

Farelerde Mesane Ağrı için bir model olarak Mesane Distansiyonunun Uyarılmış Visceromotor Cevapları

Bu protokol, dişi C57BL / 6J fareler, tümör büyümesi izlenmesinde sıçangil ortotopik mesane tümörlerinin üretimini tarif eder.

Bir Fare Ortotopik Mesane Tümör Modeli ve Tümör Tespit Sistemi

Transüretral korumak zor bir işlemdir ve de literatürde açıklanmayan. Bu yazının amacı transüretral mesane ve/veya yetişkin erkek farelerde prostat içine aktif maddeler ile sıvı İntravezikal teslim etmek için bir kateter yerleştirilmesi için bir tekniği tarif etmektir.

Yetişkin erkek fare yordamda transüretral korumak

Öğrenin fare mesane duvarına hücre enjeksiyonu için mikrocerrahi tekniği. Bu yöntem, mesane kök hücreleri ve kanser biyolojisi araştırmalarında hassas hücre yerleştirme imkanı sunar.

Fare mesane Duvar Enjeksiyon

Daha fazla video keşfet